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快速衣物消毒除霉剂杀菌效果及性能检测

  • 分类:洗染技术
  • 作者:中国洗衣通讯员
  • 来源:www.chinalaundry.cn
  • 发布时间:2011-08-24
  • 访问量:0

【概要描述】

快速衣物消毒除霉剂杀菌效果及性能检测

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  • 作者:中国洗衣通讯员
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孙善家  权力敏

       
       快速衣物消毒除霉剂为双胍类和乙醇的复方消毒液,无色透明液体,无特殊气味,聚六亚甲基双胍含量均值为1317mg/L,乙醇的含量为体积分数40.47%,pH值6.15。为研究该快速衣物消毒除霉剂的消毒相关性能,我们进行了实验室理化性能、杀菌效果、毒性以及现场消毒效果观察。现将结果作如下是介绍。
       
       1  材料与方法
       1.1 理化性能测定
       1.1.1含量测定   快速衣物消毒除霉剂中乙醇的含量测定方法按2002年版《消毒技术规范》规定的气相色谱法进行。聚六亚甲基双胍的含量检测方法采用分光光度法。具体测定步骤是(1)标准曲线的准备:用标准品分别配制浓度为0.8、1.6、3.2、4.8、6.4、mg/L的聚六亚甲基胍标准液。将分光光度计波长调至545nm,测定上述不同浓度标准溶液的吸光值,并绘制标准曲线。(2)样品液测定:用移液管吸取10ml未知浓度的聚六亚甲基胍溶液至25ml容量瓶,加1ml醋酸溶液和2.5ml指示液,以蒸馏水定容至25ml,用力振摇混匀,用分光光度计测定吸光度值。(3)计算结果:根据标准曲线,计算未知溶液的聚六亚甲基胍含量。
       1.1.2 稳定性试验  将快速衣物消毒除霉剂密封包装产品一式3份置于37℃温箱内,存放90d,取储存前后样品用上述方法检测乙醇含量和聚六亚甲基双胍含量,计算下降率 。
       1.2  菌悬液制备
       试验菌为金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)、大肠杆菌(8099)、白色念珠菌(ATCC 10231)及铜绿假单胞菌(ATCC 15442),均由军事医学科学院消毒检测中心提供。取各菌分离的典型菌落接种营养琼脂斜面(白色念珠菌用沙堡若琼脂),培养24h用其新鲜斜面培养物。用含1000mg/L胰蛋白胨生理盐水稀释液(TPS)洗下菌苔,并稀释配制成菌悬液。试验时,将菌悬液与含量30g/L牛血清白蛋白溶液作对倍稀释,使回收菌数达1×107~5×107cfu/ml。
       1.3  中和剂鉴定试验 
       试验菌为金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和白色念珠菌,试验设平行6组,按照悬液定量杀菌试验程序进行中和剂鉴定试验。结果,第1组无菌生长或有少量菌,第2组长菌数超过100cfu/ml,第3、4、5组的组间误差率不超过15%,第6组无菌生长。连续3次重复试验结果一致,为所选中和剂及其浓度适宜。
       1.4  悬液定量杀菌试验
       将试验浓度的快速衣物消毒除霉剂4.0ml分装到无菌试管中(阳性对照为TPS),置20℃水浴恒温,加入1.0ml试验菌悬液,作用至规定时间。取出0.5ml样液加到4.5ml中和剂试管内,混匀。中和作用10min,取该液进行活菌计数,计算杀灭对数值。试验至少重复3次。
       1.5  能量试验
       将快速衣物消毒除霉剂用硬水稀释成A(1.5x)、B(x)、C(0.5x)等3个浓度的药液进行检测。试验方法与结果判定均按照2002年版《消毒技术规范》能量试验的规定进行。
       1.6  现场消毒试验
       随机选择30名工作人员为志愿者,消毒前用无菌棉拭沾湿采样液分别在手指、前臂皮肤部位按规定面积作涂抹采样,将采样棉拭投入采样管内,作为阳性对照。然后用快速衣物消毒除霉剂原液对另一侧用棉拭沾湿消毒液作擦拭消毒并作用1.0min(前臂皮肤擦拭消毒作用3.0min)。用无菌棉拭沾湿含中和剂的采样液按上述方法作涂抹采样,将采样棉拭采样端剪入含中和剂的采样液试管中,作为消毒后试验组。将各组采样管经充分振荡洗脱,取洗脱液作用活菌计数,计算自然菌减少对数值。
       1.7  毒性试验
       1.7.1  急性经口毒性试验  采用一次最大限度试验。选择体重150gSD级大鼠20只,雌雄各半。染毒前,禁食过夜,不限制饮水。设剂量为5000mg/kg(体重),以2.0ml/100g(体重)用量一次性灌胃给药。灌胃后每天观察动物的中毒表现及死亡情况,连续观察14d,计算LD50值。
       1.7.2  小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验  选择ICR小鼠50只,分为5组,每组10只,雌雄各半。受试物以该消毒液原液为原形,设计5000、2000、500 mg/kg(体重)等3个剂量组,阳性对照组用40 mg/kg(体重)的环磷酰胺,阴性对照为蒸馏水。动物采用经口灌胃30h染毒法,间隔24h给小鼠灌胃2次,每次灌胃量为0.2ml/10g(体重)。末次给样品后6h颈椎脱臼处死动物,取胸骨骨髓用小牛血清稀释涂片,甲醇固定,Giemsa染色。在光学显微镜下,每只动物计数1000个嗜多染红细胞,观察含有微核的嗜多染红细胞数,计算微核率(以千分率计),按Poisson分布统计处理;计数200个嗜多染红细胞,计算嗜多染红细胞与成熟红细胞的比例(PCE/NCE)。
       1.7.3  多次完整皮肤刺激试验  选择日本大耳白兔3只,试验前24h,将家兔背部脊柱两侧的毛剪掉,去毛范围左、右各约3cm×3cm。次日取该消毒液原液0.5ml直接涂抹于家兔左侧2.5cm×2.5cm面积皮肤上,另一侧涂生理盐水作为对照。在涂抹后4h,用水清除残留受试物,每天涂抹一次,连续涂抹14d。在每次涂抹后24h观察结果,进行刺激反应评分和刺激强度评价。
       1.7.4  亚急性毒性试验  选择体重150~180g的SD大鼠40只,随机分为4组,每组10只,雌雄各半。根据小鼠经口毒性LD50值,设计40、200、1000mg/kg(体重)等3个剂量组,以蒸馏水作为阴性对照组。采用灌胃给药,灌胃量为1.0ml/100g(体重),每天灌胃1次,连续30d。试验期间每天观察动物的中毒症状与临床表现及活动情况,每周称一次体重。末次染毒24h后,摘眼球采血检测血液常规和血液生化指标。血液常规检测血红蛋白(Hb)、红细胞压积(HCT),进行红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、血小板(PLT)计数及WBC分类。血液生化指标用OLYMPUSAU400全自动生化分析仪测定总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、谷丙转氨酶(ALT)。谷草转氨酶(AST)、胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)和血糖(GLU)。颈椎脱臼处死动物作大体解剖,称肝、肾、脾、心、肺、睾丸、卵巢重量,计算脏/体比值,取肝、肾、脾、胃、十二指肠、睾丸、卵巢、脑作病理切片检查。

       2  结果
       2.1  理化性能检测结果  
       检测结果表明, 快速衣物消毒除霉剂原液乙醇含量均值3个批次样品分别为体积分数40.8%、39.9%.40.7%,总平均含量为体积分数为40.47%。聚六亚甲基双胍含量均值分别为1320、1331、1300mg/L,总平均含量为1317mg/L。稳定性试验结果表明,将快速衣物消毒除霉剂密封包装置37℃温箱储存90d,其乙醇下降率均值为0.23%;聚六亚甲基双胍下降率均值为0.67%
       2.2  中和剂鉴定试验  
       试验证明,用含6g/L硫代硫酸钠、2.5g/L亚硫酸钠、50g/L吐温80和7g/L卵磷脂的稀释液作为中和剂,能有效中和快速衣物消毒除霉剂原液对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和白色念珠菌的残留作用,且中和剂及其产物对培养基和实验菌均无影响(表1)。

 

      表1     快速衣物消毒除霉剂中和剂鉴定试验结果

      组别                                  各组平均回收菌数(cfu/ml)
                       金黄色葡萄球菌          铜绿假单胞菌          白色念珠菌

1                        0                             0                            0
2                        81                           79                          63
3                        33 600 000             16 800 000            3 840 000
4                        35 700 000             23 900 000            3 420 000
5                        34 500 000             22 400 000            2 830 000
6                        0                             0                            0

 2.3  悬液定量杀菌试验
       结果表明, 快速衣物消毒除霉剂原液对悬液内金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌、白色念珠菌作用0.5min,每次试验平均杀灭对数值均大于5.00(表2)。
       2.4  能量试验结果
       3次重复试验证明,该快速衣物消毒除霉剂的最低合格浓度为体积分数20%,折合聚六亚甲基胍343mg/L和乙醇11%。
       2.5  现场消毒试验结果
       手和皮肤各经30人次试验证明,用该快速衣物消毒除霉剂原液对手擦拭消毒作用1.0min、对前臂皮肤擦拭消毒作用3.0min,可消除皮肤上自然菌达到1个对数值以上。
       2.6  毒性试验结果
       2.6.1  急性经口毒性试验结果  该 快速衣物消毒除霉剂原液灌胃给药后,观察期间试验动物未见明显中毒症状,无动物死亡。观察期满处死全部动物,进行大体解剖观察,未见肝、肾、脾、胃、肠、心肺等脏器有肉眼可见的病理改变。雌雄动物LD50值均﹥5000mg/kg(体重),属于无毒级物质。

表2     快速衣物消毒除霉剂悬液定量杀菌试验结果

试验菌            对照组回收菌数对数值           作用不同时间(min)的杀灭对数值

                                        0.5             1.0             1.5

金黄色葡萄球菌            6.83                             5.62            6.82            6.83
                                     6.82                             5.64            6.82            6.82
                                     6.87                             5.26            6.87            6.87
铜绿假单胞菌                6.62                             4.92            6.62            6.62
                                     6.66                             4.88            6.66            6.66
                                     6.69                             4.88            6.69            6.69
大肠杆菌                       7.34                             5.28            7.34            7.34
                                     7.25                             5.32            7.25            7.25
                                     7.21                             5.36            7.21            7.21
白色念珠菌                   7.08                             7.08            7.08            7.08
                                     7.22                             7.22            7.22            7.22
                                     7.04                             7.04            7.04            7.04
 

      2.6.2  小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果  各剂量组微核率与阴性对照组比较差异无显著性,而环磷酰胺组与阴性对照组比较差异有高度显著性(P﹤0.01),各组PCE/NCE比值均在正常范围内。 快速衣物消毒除霉剂对雌雄小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果为阴性(表3)。

       表3   快速衣物消毒除霉剂小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果

       剂量组                       微核率                                      PCE/NCE

     (mg/kg•bw)   受检     含微核   微核率(‰)     受检    NCE     PCE/NCE    
                        PCE数   PCE数 (x±s)              PCE数            (x±s)

 

5000                 5000       7         1.3±0.5            1000     899      1.118±0.032
2000                 5000       8         1.5±0.5            1000     895      1.113±0.032
500                   5000       7         1.4±0.5            1000     897      1.116±0.020
0                       5000       7         1.3±0.5            1000     892      1.112±0.021
40(cp)               5000      128      24.6±5.0          1000    1087     0.913±0.021

注:标内“cp”代表阳性对照组环磷酰胺;每组试验雌雄动物各5只。

      
       2.6.3  亚急性毒性试验结果  试验期间,各剂量组试验动物体重、增重与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。对大鼠的血常规、血生化各项指标未见明显改变。对各剂量组动物作大体解剖检查时,未发现明显病变;病理切片检查结果未见与样品有关的病理改变。
       2.6.4  一次完整皮肤刺激试验结果  结果表明,该快速衣物消毒除霉剂原液擦拭皮肤,对白色家兔多次皮肤刺激试验,评分积分为0,结果判定为无刺激性。

       3  讨论
       近年来,衣物和织物的消毒除霉问题受到消毒界专家和老百姓的关注,聚本研究快速衣物消毒除霉剂含聚六亚甲基胍1300mg/L和体积分数40%乙醇,其使用浓度低于一般文献报道,但试验证明其对细菌繁殖体和白色念珠菌有良好的杀灭效果[1~3]。用聚六亚甲基双胍与乙醇的复方制成快速衣物消毒除霉剂对其消毒除霉剂的功效,稳定性和毒性试验进行全面检测尚未见报道。试验结果无毒,对皮肤无刺激,微核试验阴性,亚急性毒性试验符合规范的要求。该快速衣物消毒除霉剂杀菌效果好,性能稳定,可广泛应用于衣物、织物的消毒。

   (孙善家系青岛洁神投资集团有限公司董事长    权力敏系山东省青岛市疾病预防控制中心专家)

 

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